Ağşeftali'sinden (Prunus persica L.) polifenol oksidazın saflaştırılması, immobilizasyonu ve karakterizasyonu / Purification, immobilizationand characterization of polyphenol oxidase from agşeftali (Prunus persica L.)
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Recep Tayyip Erdoğan Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2018
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: AYŞE TÜRKHAN
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Özlem Faiz
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Türkiye'de Iğdır İli ekolojik şartları altında yetişen Ağşeftali (Prunus persica L.) olarak adlandırılan yerel şeftalisi çeşitinden elde edilen polifenol oksidaz enzimi (PFO), afinite kromatografisi ile saflaştırılmış ve saflaştırılan PFO enzimi yeni matriks antimon katkılı kalay oksit (SnO2: Sb) ince film üzerine ilk kez adsorpsiyon yöntemiyle immobilize edilmiştir. Burada, filmler, sprey piroliz tekniği ile laboratuvar koşullarında kolaylıkla sentezlenmiştir. PFO'ların SnO2: Sb ince film üzerine immobilizasyonu, Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM), Fourier Dönüşümlü Kızılötesi Spektroskopisi (FTIR), Atomik Kuvvet Mikroskopisi (AFM) ve X-Işını Difraksiyon (XRD) ile doğrulanmıştır. Elde edilen serbest ve immobilize PFO enzimleri SnO2: Sb ince film üzerine en uygun pH ve sıcaklık gibi bazı enzim optimizasyon noktalarına göre karşılaştırılmıştır. Serbest ve immobilize PFO'ların optimum pH değeri 6,0 olarak bulunmuştur. PFO'ların optimum sıcaklığı, SnO2: Sb ince film üzerinde immobilizasyon ile 20 °C'den 30 °C'ye yükselmiştir. Serbest ve immobilize enzimlerin 4-metil katekol substratı varlığında, Km değerleri sırasıyla 2,0 mM ve 1,4 mM olarak tespit edilmiştir. İmmobilize enzimin pH ve ısıl kararlılığı serbest enzime göre daha iyi olduğu bulunmuştur. İmmobilize enzimi 4 °C'de 24 saatte bir aktivite ölçümleri 15 gün sonunda başlanğıç aktivitesinin %59,13 koruduğu görülmüştür. İmmobilize enzimin tekrarlanabilirliği incelendiğinde 3 ardışık operasyonlar sonrasında ilk aktivitesinin %80,56 koruduğu ve 18 kere tekrarlanmadan sonra aktivitesinde yaklaşık %50 koruduğu görülmüştür. PFO'nun immobilizasyonuyla enzimin L-Tirosin oksidasyonunu katalizleme potansiyelinin arttığı belirlenmiştir. Anahtar kelimeler: Polifenol Oksidaz, Ağşeftali (Prunus persica L.), SnO2: Sb İnce Film, İmmobilizasyon, Karakterizasyon.